细胞焦亡（Pyroptosis）是一种由炎症信号引发的程序性细胞死亡方式，其主要特征为细胞膜的穿孔和细胞的肿胀破裂。这一过程依赖于多种炎性半胱天冬酶，尤其是caspase-1、4、5和11，同时伴随着大量促炎因子的释放，如IL-1β和IL-18。与凋亡和坏死等其他细胞死亡机制不同，细胞焦亡在形态学特征、发生机制和调控路径上都有独特之处。

为了检测细胞焦亡，918博天堂推出了BBcellProbe®细胞焦亡检测试剂盒。该试剂盒通过比色光度法监测于细胞焦亡相关蛋白酶Caspase的活化情况，以及细胞膜的破裂状态。其原理在于caspase-1/4/5能催化相应底物生成黄色的pNA，而pNA在405 nm波段有强烈吸收，因而可以通过测定其吸光度来评估相关蛋白酶的活性。同时，试剂盒还应用了细胞膜非通透性荧光探针，以检测细胞质膜的完整性。

BBcellProbe®试剂盒可以通过酶标仪或荧光酶标仪进行检测，亦可在容量不超过100 μl的情况下使用分光光度计或荧光光度计来检测培养细胞的焦亡。918博天堂还提供多种荧光标记的焦亡检测试剂盒，例如AFC、R110和AMC。通常情况下，荧光法的灵敏度优于比色法，因此建议具备荧光检测条件的实验室优先选择荧光法检测试剂盒；而若缺乏荧光检测条件，可选择918博天堂的比色法细胞焦亡检测试剂盒，但需确保样品中的细胞焦亡程度足够高。

检测方法：
- 酶标仪/荧光酶标仪
- 分光光度计/荧光光度计
- 激光共聚焦显微镜
- 流式细胞仪

样本类型：
- 细胞

实验步骤：

1. 配制裂解缓冲液和检测缓冲液。
2. 样品处理：
   1. 收集细胞，离心2-3分钟，仔细吸去培养基，尽可能将细胞收集完整。
   2. 用冷PBS洗涤细胞两次，并在每次洗涤后尽量吸干上清液。
   3. 向细胞中添加50 μl冷裂解缓冲液，高速涡旋振荡15秒。
   4. 将样品置于冰上持续振荡25-40分钟。
   5. 在4℃下以10000×g离心10分钟。
   6. 将上清液转移至另一预冷的干净离心管中，置于冰上或-80℃保存备用。

对上述处理过的上清进行蛋白定量后，即可进行焦亡检测。这一过程将为细胞焦亡的研究提供有力的技术支持，帮助科研人员更好地理解相关的生物医学机制。